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荧光定量pcr仪不同凡响的技术应用

发布时间2014-06-23        浏览次数:423


摘要:随着荧光定量pcr仪技术普及,它的功能及技术如下,在使用中需要注意它的技术参数,下面给详细分析。
、荧光定量pcr仪技术普及


随着荧光定量PCR技术的使用,在传统的96孔板仪器上大作改进。先是Stratagene的Mx3000p在检测上突破了使用CCD改用PMT检测荧光信号,大大提高了实验的灵敏度,但激发光源仍然沿用传统的卤钨灯并且没有梯度功能。
1.温度精度:设置值/显示温度的±0.25℃。
2.温度均一性:±0.5℃。
3.光学系统:五色激发光滤光片,五色发射光滤光片和CCD成像系统
4.数据采集:对所有反应孔收集的所有五色滤片的数据,试验结束后反应板设置可修改。
5.定量PCR运行时间:不超过2小时。
6.软件:应用软件(基于标准曲线的定量、相对标准曲线、基于比较Ct值的相对定量、融解曲线分析、存在/不存在、基于或非基于实时扩增的基因分型)。
第二、荧光定量pcr仪检测模式

1.光源为氙反射灯或卤钨灯激发照射,光源使用时间可监测。
2.采用CCD一次成像,96孔同步处理。
3.检测通道: 5通道,支持多重或多色PCR。
4.可应用技术方法:支持荧光染料、杂交探针、TaqMan、分子信标等检测技术方法。
5.升温速度: ≥4℃, 还可随时增加PCR循环数;温控:准确性≤±0.1℃;温度均一性≤±0.25℃。
6.同时检测96个0.2ml样品。 检测样品容量10-100ul。
7.检测模式:实时动态在线监测,扩增和检测同时进行。
8.检测灵敏度,能检测人类基因组中的单拷贝基因。