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荧光定量pcr仪杂交应用相辅相成

发布时间2014-04-01        浏览次数:1392

    
  荧光定量pcr仪整个定义过程:光弹灯发出徽发光。通过战镜等光学组块到达96孔板上。样品中发射的荧光按服原路返回,在双色镜处,由于波长与人射光不同,因此可以透过该谈到达滤镜轮,诊镜是可以旋转选择不同战镜的一个部件,它可以使特定波长的光通过,从而达到区分产物的目的。通过逮镜轮的荧光屏经过多元镜后被仪器自带的CCD相机所摘捉到,从而产生一个荧光信号。

  主要用途:

  1.定量检测:定旦:落因表达研究、转墓因食品检侧、病原体检测。

  2.相对定ri基因在不同组织中的表达差异、药物疗效考核。

  3.点突变检测:检侧与疾脚相关的等位爷因点突变。用于检侧羲因突变和墓因组的不往定性。

  特别提示:本制品中使用的TakaRa Ex Tag'" HS是利用抗Taq杭体的Hot Start的DNA辛合欣,与其他公司的化学修饰皿Hot Start用DNA欢合曲相比,如果高砚处理时间过长.会使醉的活性下降,其PCR的扩增效率、定址度都会受到影响,如果在PCf反应前进行模板的班变性。

  4.实脸结果分析

  反应结束后确认Real Time PCR的扩姗曲线和融解曲线,进行PCR定I时制作标准曲线等。

  建议采用两步法PCR反应程序,如果该程序得不到良好的实脸结果时,再进行PCR条件的优化。由于使用值较低的引物等原因,两步法PCR反应扩幼性能较差时,可以尝试进斤三步法PCR扩增反应。