鸡抗非洲猪瘟病毒抗体检测

发布时间2019-06-24        浏览次数：1286

    由于市场上没有销售鸡抗猪抗体检测试剂盒，所以实验室只有自建ELISA检测方法，通过对包被液、封闭液、待检样品浓度、酶标抗体浓度、显色时间等条件的摸索，确定佳条件，同时做了特异性检测。确定判定标准为OD450nm≧0.826时判定为阳性。
    步骤：
    1、全病毒用包被液稀释以佳浓度包被酶标板，100uL/孔，4℃过夜。
    2、拿出包被的酶标板回复室温，弃包被液，280uL/孔 PBST洗涤3次，每次3min，拍干。
    3、加入合适的封闭液，100uL/孔，37℃封闭1h，拍干。
    4、待检测样品用抗体液稀释到佳浓度，100uL/孔，37℃孵育1h，洗涤3次，拍干。
    5、HRP-兔抗鸡 二抗，用抗体稀释液按佳浓度稀释，100uL/孔，37℃孵育45min，洗涤3次，拍干。
    6、用TMB显色试剂盒，按说明依次加入溶液A，溶液B，室温避光反应。

                                                          （本文内容来源于网络，如有侵权请联系我们删除）