梯度PCR仪标准曲线总不成线性关系这是怎么回事？

  随着基因组高通量研究的需求的提高，各品牌都推出了多槽式高通量PCR仪，各有特长：MJ有一种一拖四，就是1个主机带4个扩增槽，每个槽可以控温，一次可以作96x4个样品的PCR，不过一旦出现问题4个都不能用了。这一技术保证了在梯度模式和普通模式之间可以进行可靠的信息传递，不会因为温度特性不同而导致产量和特异性的变化。

  如果你做的等比稀释，那一般都是加样误差导致的。你的移液器需要校正，不成线性，说明是曲线尾的浓度偏离较大。

  1.梯度稀释问题

  主要引起原因：a加样手法b试用低附着进口耗材。

  2.PCR管用高质量PCR管，管身不能做标记。

  3.RealtimePCR仪器若为顶部激发检测请使用透明光学管盖。

  4.PCR管不要放置在温块的边缘位置。

  5.做梯度前，把色谱柱用纯的有机溶剂冲洗一下或是用新的色谱柱，防止柱内残留物引起基线的漂移。

  6.试剂纯度都是正规的色谱纯试剂，如何纯度不够，在梯度时，也会出现基线的漂移。

  7.控制好室温或柱温，防止有较在的温度波动。